货号:10204-1, 包装:50T,价格:158元

产品别名:PAGE彩色凝胶试剂盒
英文名称:PAGE Gel Quick Preparation Kit
英文别名:PAGE
改进型PAGE-彩色凝胶配制试剂盒使用说明书
产品简介
改进型PAGE-彩色凝胶配制试剂盒提供了配制PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水即可配制。本产品保留了传统PAGE凝胶配制试剂盒的操作习惯,但又具备诸多优势:1、配胶速度快,只需20min以内便可配制1块PAGE胶;2、无需额外加入TEMED,避免了其气味引起的不适;3、蛋白转印条带更清晰;4、不含SDS成份,可用于配制变性和非变性PAGE凝胶;5、改良过硫酸铵引发效率更高更稳定,使用更便捷。
使用方法
不同分离胶(下层胶,pH 8.8)浓度分离范围:
分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6% | 50-150kD |
8% | 30-90kD |
10% | 20-80kD |
12% | 12-60kD |
15% | 10-40kD |
将配胶板洗净、晾干后,按要求装在配胶夹具上,配胶底板和盖板底面一定平行,以防止漏胶。不同浓度、体积分离胶按下表配制好后,灌入配胶板内,再加入水或异丙醇至盖板口。
胶浓度 | 组份名称 | 胶体积5mL | 胶体积10mL | 胶体积15mL | 胶体积20mL |
6% | 水 30%Acr-Bis 分离胶缓冲液 改良过硫酸铵 | 2.75 1.0 1.25 0.015-0.05 | 5.5 2.0 2.5 0.03-0.1 | 8.25 3.0 3.75 0.045-0.15 | 11 4.0 5.0 0.06-0.2 |
8% | 水 30%Acr-Bis 分离胶缓冲液 改良过硫酸铵 | 2.42 1.33 1.25 0.015-0.05 | 4.8 2.7 2.5 0.03-0.1 | 7.25 4.0 3.75 0.045-0.15 | 9.7 5.3 5.0 0.06-0.2 |
10% | 水 30%Acr-Bis 分离胶缓冲液 改良过硫酸铵 | 2.08 1.67 1.25 0.015-0.05 | 4.17 3.33 2.5 0.03-0.1 | 6.25 5.0 3.75 0.045-0.15 | 8.3 6.7 5.0 0.06-0.2 |
12% | 水 30%Acr-Bis 分离胶缓冲液 改良过硫酸铵 | 1.75 2.0 1.25 0.015-0.05 | 3.5 4.0 2.5 0.03-0.1 | 5.25 6.0 3.75 0.045-0.15 | 7.0 8.0 5.0 0.06-0.2 |
15% | 水 30%Acr-Bis 分离胶缓冲液 改良过硫酸铵 | 1.25 2.5 1.25 0.015-0.05 | 2.5 5.0 2.5 0.03-0.1 | 3.75 7.5 3.75 0.045-0.15 | 5.0 10.0 5.0 0.06-0.2 |
待分离胶凝固后,弃去上层水或异丙醇(弃去后可用滤纸将残余液体吸干),灌入按下表配制的浓缩胶(上层胶,pH 6.8)至略高过板口,再插入样品梳,凝胶后即可。
组分名称 | 2mL | 4mL | 6mL | 8mL |
水 30%Acr-Bis 浓缩胶缓冲液 改良过硫酸铵 | 1.14 0.34 0.5 0.02 | 2.28 0.68 1.0 0.04 | 3.42 1.02 1.5 0.06 | 4.56 1.36 2.0 0.08 |
预混胶配制 根据需要的胶浓度和体积,按分离胶、浓缩胶配制表比例将水、30%Acr-Bis、分离胶(或浓缩胶)缓冲液混合好后(不要加入过硫酸铵),装入棕色瓶中。例如:1次制胶使用8%分离胶溶液5mL,10块胶共50mL。配制时,按水24.2mL、30% Acr-Bis 13.3mL、分离胶缓冲液12.5mL混合后即为8%分离预混胶溶液50mL,装入棕色瓶中4℃保存,浓缩胶预混液配制方法相同。配好的预混胶请在三天内用完。
注意事项
1、采用的改良过硫酸铵溶液具有更高的稳定性和引发能力,使用后4℃可稳定存放3个月效果几乎不衰减,长期保存需放入-20℃。
2、过久存放出现不凝胶问题,需额外加入TEMED。
3、室温条件下配制分离胶时,过硫酸铵推荐用量为0.02mL(预混胶可适量增加)。由于气温原因引起的凝胶速度变化,可通过调节APS的用量加以调整,凝胶时间控制在3-5min即可。
4、本试剂盒凝胶速度快,如一次需要连续配制数块胶时,可通过控制APS用量来控制凝胶时间。也可先配制成预混胶,倒出1块胶需要的体积,再加入过硫酸铵溶液后灌胶,以防因凝胶速度快引起的无法灌胶或凝胶分界线扭曲的问题。
5、配制变性PAGE凝胶无需加入SDS。进行非变性PAGE电泳时,因蛋白酸碱性不同造成实验要求有差别,请根据具体实验情况选用。本试剂盒浓缩胶pH 6.8。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、配套我公司的快速电泳缓冲液使用,10-150KD的蛋白分子量推荐凝胶浓度为7%
产品规格
30%Acr-Bis 100mL 1瓶,分离胶缓冲液(pH 8.8)70mL 1瓶,彩色浓缩胶缓冲液(pH 6.8)30mL 1瓶,改良过硫酸铵 5mL 1瓶。
贮存条件
4℃保存,有效期1年。
使用建议:建议配合我公司快速电泳缓冲液和快速转膜缓冲液使用,可以大大缩短实验时间,建议电泳电压 150V 或 240V,这样可以缩短电泳时间,且不会影响蛋白marker实验分布结果!