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qPCR系列

染料法荧光定量PCR试剂盒(含ROX)

SYBR Green qPCR Master Mix 说明书下载


货号:Y-113-1, 包装:1ML,价格:300元
货号:Y-113-2, 包装:5×1ML,价格:1200元

Y-113
Tel:029-88081325
QQ:1932526095
Email: proandybio@163.com

产品名称:染料法荧光定量PCR试剂盒(含ROX)
产品别名:SYBR Green qPCR Master Mix
英文名称:2×qPCR Mix (SYBR Green)
英文别名:Realtime PCR Kit,RT-PCR Kit
储存条件:-20°C


荧光定量(含ROX).jpg





2×qPCR MixSYBR Green

 

产品简介

本产品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行qPCR的专用试剂,可对目的基因片段进行定量检测。产品采用了抗体修饰的新型热启动Taq DNAPolymerase,配合创新优化的最适Buffer,可以在所有Real-Time PCR仪平台进行高特异性、高灵敏度的qPCR检测,定量结果准确、重复性好、可信度高。ROX Reference Dye I/II用于校正仪器孔间误差,可根据实验所用仪器选择添加。

 

产品组成

组分

100 rxns/20μlreaction

500 rxns/20μlreaction

2×qPCR Mix (SYBR Green)

1.0 mL

5×1.0 mL

50×ROXReferenceDye I

40 µL

200 µL

50×ROXReferenceDye II

40 µL

200 µL

 

实验流程

1. qPCR管中配制如下反应体系

2×qPCR Mix (SYBR Green)a

10.0 µl

Primer1 (10 µM)b

0.8 µl

Primer2 (10 µM)b

0.8 µl

Template DNA/cDNAc

x µl

50× ROX Reference Dye I/IId

0.4 µl

ddH2O

Up to 20.0 µl

 

a 使用前请确认完全溶解,并充分混匀。

b通常反应体系中引物终浓度为0.4 μM。当反应性能较差时,可以在终浓度0.1 - 1.0 μM范围内调整优化。

c模板加入量因待测基因拷贝数差异而不同,可进行模板梯度稀释预试验得到最佳用量。模板用量建议不超过100 ng。推荐将模板稀释后加入反应体系中,以提高实验的重复性。如模板为未稀释cDNA原液,加入体积不应超过qPCR反应总体积的1/10

d 根据所使用Real-TimePCR仪机型确定ROX Reference Dye使用情况,如下所示:

  ROX Reference Dye I: Applied Biosystems 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne, StepOnePlus.

  ROX Reference Dye II: Applied Biosystems 7500, 7500 Fast, ViiA7; Stratagene MX4000, MX3005P, MX3000P.

  无需添加ROX Reference Dye: Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Cepheid SmartCycler; Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s; Illumina Eco qPCR;

Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science LightCycler 480; Thermo Scientific PikoReal Cycler.

 

 

 

 

 

 

 

 

2. 按照如下程序进行qPCR反应

阶段

温度

时间

循环数

预变性a

95℃

30 sec

1 cycle

循环反应

95℃

10 sec

40 cycles

60采集荧光信号

60℃

30 sec

溶解曲线b




 

a 该预变性条件适合绝大多数扩增反应;若模板结构复杂,可延长时间至3min以提高预变性效果。

b 使用仪器默认融解曲线采集程序。

 

保存条件

-25 ~ -15℃避光保存;

2×qPCR Mix解冻后可于2 ~ 8℃避光条件下存放3个月,避免反复冻融。

 

技术支持

本公司产品使用过程中如有任何疑问与建议,欢迎随时与我们联系。