货号:Y-112-1, 包装:1ML,价格:450元
货号:Y-112-2, 包装:5×1ML,价格:2000元
产品别名:探针法荧光定量试剂盒
英文名称:2×qPCR Mix (Probe)
英文别名:Probe
2×qPCR Mix (Probe)
产品简介
本产品是采用探针法进行qPCR的专用试剂,可对目的基因片段进行定量检测。产品采用了抗体修饰的新型热启动Taq DNAPolymerase,配合创新优化的最适Buffer,能够进行高特异性、高灵敏度的qPCR检测,定量结果准确、重复性好、可信度高。本产品不包含ROX Reference Dye,适用于无需添加ROX的Real-Time PCR仪。
产品组成
组分 | 100 rxns/20μlreaction | 500 rxns/20μlreaction |
2×qPCR Mix (Probe) | 1.0 mL | 5×1.0 mL |
实验流程
1. 在qPCR管中配制如下反应体系
2×qPCR Mix (Probe)a | 10.0 µl |
Primer1 (10 µM)b | 0.4µl |
Primer2 (10 µM)b | 0.4µl |
TaqMan Probe (10 µM)c | 0.2µl |
Template DNA/cDNAd | x µl |
ddH2O | Up to 20.0 µl |
a 使用前请确认完全溶解,并充分混匀。
b 通常反应体系中引物终浓度为0.2 μM。当反应性能较差时,可以在终浓度0.1 - 1.0 μM范围内调整优化。
c 探针浓度通常在0.05 - 0.25 μM范围内调整。
d 模板加入量因待测基因拷贝数差异而不同,可进行模板梯度稀释预试验得到最佳用量。模板用量建议不超过100 ng。推荐将模板稀释后加入反应体系中,以提高实验的重复性。如模板为未稀释cDNA原液,加入体积不应超过qPCR反应总体积的1/10。
2. 按照如下程序进行qPCR反应
阶段 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 30 sec | 1 cycle |
循环反应 | 95℃ | 15 sec | 45 cycles 60℃采集荧光信号 |
60℃ |
保存条件
-25 ~ -15℃避光保存。
技术支持
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