货号:10311-1, 包装:5ML,价格:120元
产品别名:含DAPI的抗荧光淬灭封片液
英文名称: Mounting Medium, antifading (with DAPI)
英文别名: Mounting Medium, antifading (with DAPI)
含DAPI的抗荧光淬灭封片液
产品简介:该试剂盒中的DAPI的浓度为0.4ug/ML。
蓝色荧光DAPI常用于细胞核染色,优先与双链DNA结合,可与小沟中的AT结合,DAPI与双链DNA结合后,由于DAPI和小沟中的水分子被置换,可产生20倍的荧光强度,DAPI亦可与RNA结合,但结合的模式不同,DAPI/RNA复合体与DAPI/DNA复合体相比,发射波长较长(前者500nm,后者460nm),在多色荧光染色技术中,DAPI也是较常用的核复染剂,其蓝色荧光可与绿色,黄色或红色形成鲜明的对比,DAPI可特异性的染核,几乎不标记细胞质。
抗荧光淬灭封片液是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂,可以用于减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭。
操作流程:1---贴壁细胞的复染
a---样品准备,使用恰当的固定剂固定样品,一般情况下,最后用DAPI对细胞进行染色。
b---复染流程。用PBS短暂平衡样品,加入适量的DAPI染液,保证所有的细胞均被覆盖,孵育3-5min,用PBS漂洗样品数次,用吸水纸将多余的液体吸干,用配有恰当滤片的荧光显微镜观察样品。
2---悬浮细胞的复染
a---样品准备,收集悬浮细胞2×105---1×106个细胞,通过离心,使细胞沉淀,弃上清。轻弹试管,使沉淀在剩余的液体中重悬,在加入1MLPBS,将细胞悬液缓慢的加入4ML的乙醇中,同时以最大的速度涡旋,将含有细胞的乙醇在-20℃放置5-15min,通过离心,使细胞沉淀,弃上清,轻弹试管,使沉淀松散,在加入5ML的PBS.
b---复染流程,离心使细胞沉淀,弃上清,轻弹试管,使沉淀松散,加入2-3ML DAPI染液,室温下孵育15min,如果使用荧光显微镜观察细胞,将样品离心后,弃上清,用新鲜的缓冲液重悬沉淀,在显微镜载玻片上滴加一滴细胞悬液,加盖片后观察。
注意事项:
a---荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存,在使用抗荧光淬灭封片液的情况下,可以减少淬灭,但仍宜尽量避光。
b---它是流动性较好的封片液,在封片后盖玻片和载玻片不会完全沾粘,但不会影响常规的荧光观察,如希望把盖玻片和载玻片沾粘在一起,可在盖玻片的四周用指甲油进行封闭和沾粘。
c---第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
温馨提示:
为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。
保存条件:-20℃避光保存