产品名称：快速BCA蛋白定量试剂盒

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英文名称：Rapid BCA protein quantitative Kit

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储存条件：RT

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应用:科研

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快速BCA 蛋白定量试剂盒

产品简介：

            BCA蛋白定量法是利用蛋白质可将 Cu²⁺还原成 Cu⁺，而生成的Cu⁺可与BCA形成紫色络合物的原理来定量检测蛋白含量。该方法快速、稳定、选择性好，不受蛋白种类影响、且在一定浓度范围内受表面活性剂影响小，成为目前应用最广泛的蛋白定量方法之一，可实现对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。本试剂盒标准品采用高质量BSA且可以4℃保存，使实验更精准便捷。

使用方法

         1. 按下表在酶标板中做蛋白标准品稀释。稀释时，先向每孔加入对应体积二次水，再按照蛋白浓度由低到高的顺序依次加入蛋白标准品溶液，混匀。标准孔稀释好后，再根据需要向空孔中加入原样或稀释后的样品溶液，每孔20μL。建议标准孔和样品孔均做3次平行对照。

	1	2	3	4	5	6	7	8	9
二次水 (μL)	20	19.5	19	18	16	12	8	4	0
蛋白标准品 (μL)	0	0.5	1	2	4	8	12	16	20
蛋白含量 (μg)	0	0.5	1.0	2.0	4.0	8.0	12.0	16.0	20.0

          2. 工作液按照BCA试剂 A和BCA试剂 B以50:1的比例混合，每孔加200 µL，混匀。所需工作液总体积 µL =200 µL×总孔数×1.1。1.1系数可自行调整，保证每孔有足量工作液加入即可。

          3. 将酶标板放入水浴锅中（不可将酶标板浸于水中），37℃ 孵育10 min或目测更合适时间，如样本蛋白浓度过低也可60℃孵育，孵育时如酶标板盖板冷凝水较多时，可用吸水纸擦去。孵育结束后，用酶标仪或nano drop测定每孔562 nm处的吸光值。

           4. 以每孔蛋白含量为横坐标，标准品每孔吸光度减去空白孔吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，并计算样品孔蛋白含量。计算样品孔蛋白含量时，所用吸光度值应扣去空白孔数值。样品蛋白浓度μg/μL= 标准曲线计算出的样品孔蛋白含量μg÷20 μL，如测定样品经过额外稀释，在计算原样时还应还应乘以稀释倍数。

注意事项：

           1. 蛋白标准品原液为1 μg/μL，方便自行设计蛋白标准孔含量梯度。标准孔加入的蛋白标准品原液体积数 (μL) 即为该孔的蛋白绝对含量值 (μg)，再用二次水补足体积至20 μL即可。

           2. 本试剂盒每孔最小检测蛋白量为0.5 μg。

         3. 确保样品中SDS、Triton X-100、Tween等表面活性剂含量低于5%，EDTA低于10 mM，无EGTA，DTT、β-巯基乙醇低于1 mM。

贮存条件

          BCA试剂 A与BCA试剂 B室温保存，蛋白标准品4℃保存。

包装规格

          

BCA试剂盒	A液	B液	1 μg/μL蛋白标准品
50ML	50ml	1ml	5ml
100ML	100ml	2ml	10ml
500ML	500ml	10ml	50ml