货号:10409-1, 包装:100ml,价格:60元
英文名称:Crystal Violet Ammonium Oxalate Solution, 1%
1%结晶紫染色液(染细菌)
产品简介:
1%结晶紫染色液(染细菌)是革兰氏染色法中的一种成分,主要由结晶紫,乙醇,草酸铵等组成,革兰阳性菌染色中,细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色,染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚的观察到细菌的形态,排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。
自备材料:
接种环或挑取细菌的其他工具,酒精灯,载玻片,光学显微镜。
操作步骤:
1---按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色方法。
2---涂片,取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均匀,涂成薄层。
3---干燥,涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
4---固定,手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3-5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色,也可以用甲醇或乙醇固定。
5---初染,滴加1%结晶紫染色液(染细菌)染色1-2min,清水冲洗去染色液。
6---媒染,滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置1-2min,水洗。
7---脱色,滴加脱色液摇动,摇动10-30s,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
8---复染,滴加沙黄染色液染色,30-60s,水洗。
9---干燥,镜检,置油镜观察。
染色结果:
革兰氏阳性菌 | 蓝色至紫色 |
革兰氏阴性菌 | 红色 |
注意事项:
1---涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续实验的位置。
2---取细菌时,应注意自我防护,拔或塞试管塞时,应将试管口通过火焰略加烧灼,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
3---加热固定涂片时,应注意玻片勿太靠近火焰,一般要求玻片温度不超过60℃,以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。
4---革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度,脱色时间应根据经验判断,脱色过度,阳性菌可被误染为阴性菌,脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。
5---待检细菌培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解,常呈阴性。
6---为了您的安全健康,请实验前穿好实验服并戴一次性手套。
保存条件:室温避光