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分子生物学

RNAstore样本保存液

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货号:10420-1, 包装:100ML,价格:280元

10420
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Email: proandybio@163.com

产品名称:RNAstore样本保存液
英文名称:RNAstore Reagent
储存条件:RT

RNAstore样本保存液.jpg

RNAstore样本保存液

RNAstore Reagent

 

产品简介

           RNAstore是一种液态的,无毒的组织保存试剂,它能迅速渗入组织细胞中,通过抑制RNase活性从而保护非冷冻细胞RNA于原位,使其更适合于组织基因表达谱的分析,获得组织块后,迅速浸泡在RNAstore中保存,而不会引起RNA的降解,这样可以不必马上处理样本,也不必将样本冷冻在液氮中,RNAstore可广泛应用于多种脊椎动物样本,包括脑,心,肾,脾,肝,肺和胸腺。

推荐不同组织样品的RNAstore使用量:

大鼠的不同组织

组织重量(mg

RNAstore的使用量(ml

100-500

1-5

100-300

1-3

100-300

1-3

100-170

1-1.7

100-1000

1-10

新鲜非冷冻组织按1:10比例浸入RNAstore后,常温1--371天,4℃至少保存1个月,组织4℃浸泡过夜后-20℃或-80℃长期保存,RNAstore保存的组织可以反复冻融至少20次。


注意事项:请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项

1--RNAstore只能用于新鲜组织,在浸入RNAstore之前不能冷冻组织。

2--要求组织样本任何一边的最大厚度不能大于0.5cm,然后将组织块放入到10倍体积的RNAstore中保存。如果组织样品厚度过大,RNAstore渗入组织样本中速度将会减慢造成RNA降解,所以如果厚度超过0.5cm需简单切碎组织后再在RNAstore中贮存。

3--该试剂不适合于保存植物叶片,其表面的蜡表皮使RNAstore很难完全渗入组织中。

4--对于组织培养细胞的操作,先沉淀细胞,用PBS洗一次,再用少量的PBS悬浮细胞,然后加入2倍体积的RNAstore保存,后续RNA的提取可以采用直接离心去除RNAstore后进行RNA提取,也可以不用去除RNAstore直接加入RNA提取裂解液进行直接提取。

离心法:因为RNAstore的介质浓度比典型的细胞培养介质浓度高,因此用通常沉淀活细胞的离心力无法沉淀RNAstore中的细胞,离心沉淀细胞,去除RNAstore,至少需要5000×g的以上的离心力。

直接提取法:通过向细胞混合物中加入10倍体积的RNA提取试剂来完成。

5--对于细菌操作,先离心收集细菌,用PBS洗一次,再用少量的PBS悬浮细胞,加入2倍体积的RNAstore保存,后续RNA的提取参照组织细胞的提取步骤,大肠杆菌保存在RNAstore4℃条件下1个月仍很完整,产生的不降解的RNA.

6--对于全血中的白细胞保存,需将白细胞从红细胞和血清中分离出来,并按组织培养细胞一样处理后,白细胞便能有效地保存在RNAstore中,不要将全血,血浆或血清中的RNA保存在RNAstore中,因为它们的蛋白含量高,与RNAstore混合后易形成不溶的沉淀。


操作步骤

1--切割组织前估计加入RNAstore中的组织重量,并根据加入至少10倍体积组织的量确定RNAstore的使用量(譬如:组织100mg,需加入1mlRNAstore

2--切割组织后放入RNAstore中,如果组织样本过大需剪切橙任何一边的最大厚度不能大于0.5cm

注意:为了安全有效的保护组织样本,该组织样本应完全浸没入RNAstore中,并且组织样本的任何一边的最大厚度不应超过0.5cm

3--贮存于RNAstore中的样品组织4℃可至少保存1个月,室温1周,371天。对于-20℃或-80℃长期保存,先将样本在4℃条件下过夜渗透,然后将组织从RNAstore中取出后放入-20℃或-80℃长期保存,样本可随后在室温下解冻及再冻存,其RNA的质和量都不会受影响。

注意:建议组织样品在RNAstore中低温保存(4℃可至少保存1个月,-20℃或-80℃长期保存),不建议37℃或室温保存,冻存于-20℃或-80℃的组织可反复冻融至少20次不影响RNA提取,保存于RNAstore中的组织如果需要长途运输,运输过程中需要确保组织完全浸入RNAstore中。

4--RNAstore中取出样品就可以用RNA提取试剂盒,直接提取RNA.


保存温度

      RT(如溶液产生沉淀或晶体析出,用之前需37℃完全溶解沉淀,不影响效果)