货号:10454-1, 包装:100ML,价格:190元
英文名称:Oil Red OStaining Solution
改良型油红O染液
(Oil Red OStaining Solution)
产品简介:
利用染料易溶于脂质的性质,检测组织中脂肪含量的多少。
操作流程:
1、本品为工作液(已稀释好了),室温下放置10min,0.22μm滤膜过滤。
2、细胞染色程序-----①当培养细胞的密度达到5-6×10∧5cells/ml时,倒掉培养基,用0.01MPBS洗涤细胞2次;②细胞固定,用含10%甲醛的磷酸盐缓冲液固定细胞10min; ③ 漂洗,细胞用PBS漂洗一次(1min),然后用60%异丙醇冲洗15s,促进中性脂肪的染色;④油红O 染色,避光室温处,用已过滤的油红O 工作液染细胞10-20min;⑤脱色,用60%异丙醇处理细胞15s;⑥漂洗,用PBS漂洗3次,每次3min;⑦复染,可用苏木素复染1min;⑧漂洗,用PBS漂洗3次,每次3min;⑨封片剂封片;⑩显微镜下观察,阳性染色细胞为红色。
3、冰冻切片染色程序
①福尔马林固定冰冻切片后,流动自来水冲洗1-10min
②60%异丙醇漂洗
③新鲜制备的油红O工作液染色15min
④60%异丙醇漂洗
⑤在苏木素染色液中蘸5下,轻轻染核
⑥蒸馏水漂洗
⑦水溶性封片剂或甘油明胶封片剂封片
注意事项:
① 由于脂肪易溶于有机溶剂,所以一般用冰冻切片染色来显示
②做脂肪染色的切片不能太薄,过薄的切片常常会使脂质丢失
③如果使用苏木素进行复染,复染时间不能过长
④染色结果不能长期保存,应尽快拍照并观察
⑤第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验
⑥为了您的自身安全,使用试剂前请做好防护,如穿实验服带手等。
保存温度:
室温避光。