货号:10471-1, 包装:4x100ML,价格:180元
英文名称:GRAM Micro-OrganismsStaining Solution
革兰氏染色试剂盒
产品组成:
4x100ML | |||
10471-1A | 草酸铵结晶紫染液 | 100ML | RT |
10471-1B | 革兰氏碘液 | 100ML | RT |
10471-1C | 脱色液 | 100ML | RT |
10471-1D | 番红复染液 | 100ML | RT |
产品简介:
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴定染色法,媒染剂碘液进入菌体后与结晶紫结合,革兰氏阳性菌对碘与结晶紫摄取量最多且牢固,不易被酒精脱色,革兰氏阴性菌对碘与结晶紫摄取量少且不牢固,易被酒精脱色。为观察方便,脱色后再用一种红色染料,如碱性番红进行复染。阳性菌仍为紫色,阴性菌则被染为红色。
实验操作:
A---准备
1---使用无菌接种环,挑取一薄层样品置于载玻片上并涂片。接种环通过酒精灯火焰灼烧而达到无菌,使用前可以冷却30s,如果检测的组织样品可能被细菌污染,或者在培养基中有细菌生长,可直接用接种环挑取样品并置于载玻片上;如果检测培养板上生长的细菌克隆,可现在载玻片上滴加一滴无菌水,然后挑取一个克隆,并将其置于水中。
2---使涂片自然干燥,热固定,在酒精灯的火焰上路过2-3次。
注意:不要将载玻片持续置于火焰上,以免样品过热。
B---染色
1---将热固定后载玻片置于装有草酸铵结晶紫染液的染缸中,使载玻片在染缸中站立1min,
2---使用自来水轻轻洗载玻片5s,抖掉多余的水。
3---将载玻片置于装有革兰氏碘液的染缸中1min,水洗,并抖掉多余的水。
C---脱色和复染
1---略微倾斜载玻片,将脱色液滴加在载玻片上端,使其下滑通过样品区,直至紫色出现为止,重要的是,脱色既不能过度也不能不足,如果脱色过度,可将革兰氏阳性菌误判为阴性菌;如果脱色不足,可将革兰氏阴性菌误判阳性菌。
2---水洗5s,抖掉多余的水分。
3---使用番红复染液染色1min。
4---水洗5s,抖掉多余的水分,允许其自然干燥,或者用吸水纸小心的将水分吸干。
D---镜检
在油镜(900x-1000x)下观察细菌以区分革兰氏阳性菌和阴性菌。不要使用盖玻片,在载玻片中间加一滴油观察细菌,如果需要,载玻片可保存于载片盒中数月再观察。
染色结果:
革兰氏阳性菌---蓝紫色,革兰氏阴性菌---红色。
注意事项:
1---革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度,菌种也影响染色结果,如阳性菌培养时间过长,或已死亡及部分菌自行溶解,都常呈阴性反应。
2---标本涂片不能太厚。
3---玻片通过火焰温度不能过高。
4---若涂片较厚,延长脱色时间,直至不再出现紫色为止。
5---碘液变透明,则不能使用。
6---水洗时动作要轻柔,沿载玻片对角线方向用洗瓶冲洗,以免把菌体冲掉。
7---第一次使用本品时,建议先取1-2个样品做预实验。
温馨提示:
为了您的自身安全,使用本品前,请做好防护!