货号:10521-1, 包装:100ML,价格:80元
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产品名称:TMK 缓冲液(pH=7.6)
英文名称: TMK buffer
英文名称: TMK buffer
储存条件:RT
TMK 缓冲液(pH=7.6)
产品简介:
生物的基本功能单位是细胞。为了研究细胞器的构造和机能,需要对其采用恰当的方法进行分离、纯化,从 而获得较高质量的细胞器。动物细胞破碎后,低速离心去除核及线粒体等较大颗粒后,再以较大离心力获得微粒 体,其中大部分为内质网。TMK 缓冲液(pH=7.6)主要由 Tris-HCl、氯化镁、氯化钾组成,简称为 TMK buffer,主要用于分离内质网。
操作步骤:
1. 分别用 TMK 缓冲液(pH=7.6)配制 0.88mol/L 蔗糖溶液、1.3mol/L 蔗糖溶液、2mol/L 蔗糖溶液。
2. 将分离好的微粒体沉淀重悬于 10 倍体积的 0.88mol/L 蔗糖溶液。
3. 取一超速离心管,按 2:2:7 的比例依次轻轻加入 2mol/L 蔗糖溶液、1.3mol/L 蔗糖溶液、含有微粒体沉淀的 0.88mol/L 蔗糖溶液。
4. 190000g 离心 4h。样品溶液与 1.3mol/L 蔗糖溶液之间为滑面内质网,1.3mol/L 与 2mol/L 蔗糖溶液之间为粗 面内质网,沉淀为游离性核糖体。
5. 滑面内质网与滑面内质网分别用 TMK 缓冲液(pH=7.6)稀释,100000g 离心 60min。
保存温度:RT
注意事项: 1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。